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產(chǎn)品目錄
通用型基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)產(chǎn)品性能特點
更新時間:2021-08-04 點擊量:3064

通用型基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)

版號:TQ 201909001

產(chǎn)品概述

本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA 的離心吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng),用于提取血液、唾液、口腔拭子、動物組織、糞便、飼料中的基因組DNA??勺畲笙薅热コs質(zhì)蛋白及細胞中其他有機化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒回收的DNA 可適用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、熒光定量PCR,文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。

試劑盒組成

序號

產(chǎn)品組分

規(guī)格(50測試/盒)

序號

產(chǎn)品組分

規(guī)格(50測試/盒)

1

緩沖液GA(Buffer GA)

15 ml

5

洗脫緩沖液TE(Buffer TE)

15 ml

2

緩沖液GB(Buffer GB)

15 ml

6

Proteinase K

1 ml

3

緩沖液GD(Buffer GD)

13 ml

7

吸附柱CB3(Spin Columns CB3)

50個

4

漂洗液PW(Buffer PW)

15 ml

8

收集管(2 ml)(Collection Tubes)

50個

適用范圍 血液、唾液、口腔或環(huán)境拭子、動物組織、糞便、飼料等樣品。

注意事項

請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。

1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA/RNA片段較小且提取量也下降。

2.若無特別說明,所有離心步驟均在室溫完成。

操作步驟

使用前請先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。

1  樣本前處理

1.1 血液

a. 取200 μl新鮮、冷凍或加入各種抗凝劑的血液

b. 加入20 μl Proteinase K溶液

c. 加入200 μl緩沖液GB,充分顛倒混勻,70放置10 min,溶液應(yīng)變清亮,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

d. 加人200 μl 無水乙醇,充分振蕩混勻15 sec,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

1.2 組織

a. 切取30-50 mg 動物組織樣品,加入準備好的 2.0ml 離心管,樣品應(yīng)盡量破碎,便于后續(xù)消化;

b. 加入20 μl Proteinase K溶液200 μl緩沖液GA ,渦旋振蕩混勻,于恒溫水浴鍋 65 ℃水浴30 min,期間每隔 3-5 min 渦旋混勻或者置于水浴振蕩儀中消化(如組織塊未消化*,應(yīng)延長水浴時間至組織塊消失),簡短離心以收集附著在管壁及管蓋的液體。

c. 加入200 μl緩沖液GB,充分顛倒混勻,70放置10 min,溶液應(yīng)變清亮,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

d. 加人200 μl 無水乙醇,充分振蕩混勻15 sec,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

1.3 拭子

a. 如果是干拭子樣本直接加入500 μl緩沖液GA;如果是含有唾液保存液的拭子樣本,拿到樣品管后混勻,12000 rpm離心3 min,去上清保留100 μl的體積,再加入500 μl緩沖液GA。

b. 加入20 μl Proteinase K溶液,渦旋10 sec混勻,65放置30 min,每隔10 min渦旋混勻數(shù)次。然后吸取400 μl上清進行后續(xù)實驗。

c. 加入等體積400 μl緩沖液GB,65放置15 min,每隔5min渦旋混勻數(shù)次。

d. 加入400 μl無水乙醇,充分顛倒混勻。

1.4 唾液

a. 按照要求取出200 μl唾液樣本,加入等體積200 μl緩沖液GA

b. 加入20 μl Proteinase K溶液,顛倒混勻,65放置30 min,每隔10 min渦旋混勻數(shù)次。

c. 加入等體積400 μl緩沖液GB,65放置15 min,每隔5min渦旋混勻數(shù)次。

d. 加入400 μl無水乙醇,充分顛倒混勻。

1.5 糞便

a. 稱取糞便樣本150 mg-300 mg 至 2.0ml 離心管,加入800 μl緩沖液GA,渦旋1min,65℃水浴10 min,期間顛倒混勻幾次。

b. 水浴后12,000 rpm(約13,400×g) 離心3min,取300 μl 上清至新的2 ml 離心管中。

c. 注意:(選做) 若后續(xù)實驗對 RNA 敏感,可加入RNase A 溶液去除RNA。

d. 加入20 μl Proteinase K,振蕩混勻,再加入300 μl 緩沖液 GB,渦旋振蕩混勻,65 ℃水浴放置15 min,期間每隔3-5 min 振蕩混勻。

e. 簡短離心后加入300 μl 無水乙醇,顛倒數(shù)次混勻。

*注意:加入無水乙醇后可能會出現(xiàn)渾濁,但不影響DNA 提取。

1.6 飼料

a. 切取30-50 mg 飼料樣品,加入準備好的 2.0 ml 離心管,加入20 μl Proteinase K溶液500 μl緩沖液GA ,渦旋振蕩混勻,于恒溫水浴鍋 65 ℃水浴30 min,期間每隔 3-5 min 渦旋混勻或者置于水浴振蕩儀中消化(如遇到比較干的飼料樣本,可適當(dāng)延長裂解時間)。

b. 12,000 rpm(約13,400×g) 離心3min,取300 μl 上清至新的2 ml 離心管中。

c. 加入300 μl緩沖液GB,充分顛倒混勻,70放置10 min,溶液應(yīng)變清亮,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

d. 加人300 μl 無水乙醇,充分振蕩混勻15 sec,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

2 吸附

a. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm (~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。

3 漂洗

a. 向吸附柱CB3中加入500 μl緩沖液GD (使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。

b. 向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm (~13,400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。

c. 重復(fù)操作步驟b。

d. 將吸附柱CB3放回收集管中,12,000 rpm(~13,400×g)離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘,以*晾干吸附材料中殘余的漂洗液。


實驗代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

HE染色

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化IHC染色

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細胞檢測

免疫熒光染色

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

石蠟/冰凍切片

透射電鏡服務(wù)

掃描電鏡實驗

蛋白雙向(2-D)

動物實驗

免疫共沉淀

原位雜交(FIsh

蛋白質(zhì)純化

分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù)

組蛋白甲基化磷酸化乙酰化

 

蛋白雙向2D-WB

 

藥理毒理動物實驗

 

番紅O固綠染色

明膠酶譜MMP

酶活性檢測

動物造模/模型實驗服務(wù)


滬公網(wǎng)安備 31011802001677號

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